Dentysta Kraków
Stomatologia i dentystyka w Krakowie

Rhinovirus Wheezing Choroba i ryzyko genetyczne astmy u dzieci AD 4

Posted in Uncategorized  by admin
September 5th, 2019

Model obejmował fenotyp będący przedmiotem zainteresowania jako zmienną wynikową i genotyp jako zmienną objaśniającą. Aby przetestować interakcje między genotypami SNP 17q21 a wirusowymi (HRV lub RSV) chorobami świszczącego oddechu, wirusowe świszczące choroby i termin interakcji wirusowego świszczącego oddechu z genotypem zostały włączone jako współzmienne. Ponadto liczba epizodów świszczącego oddechu, w których obecny był inny wirus (tj. Nie-HRV lub nie-RSV), została włączona jako współzmienna, aby upewnić się, że zaobserwowane efekty są specyficzne dla testowanego wirusa. Szczegóły metod statystycznych podano w dodatkowym dodatku. HRV16 Stymulacja PBMC i ekstrakcja DNA i RNA
Próbkę krwi (20 ml) uzyskano od każdego dorosłego uczestnika. PBMC izolowano z próbek krwi pełnej za pomocą protokołu separacji Ficoll-Paque. Łącznie 4 x 106 PBMC od każdego uczestnika traktowano samym podłożem przez 24 godziny, a 4 x 106 PBMC traktowano pożywką zawierającą HRV16 przez 24 godziny. Wielość infekcji wynosiła 10 jednostek tworzących łysinki na komórkę. Pozostałe komórki od każdego uczestnika użyto do ekstrakcji DNA. DNA zostało wyekstrahowane w dniu, w którym pobrano próbki krwi, za pomocą zestawu QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen). Całkowity RNA ekstrahowano po 24-godzinnym okresie inkubacji, przy użyciu zestawu RNeasy Plus Mini Kit (Qiagen). Szczegóły procedur eksperymentalnych znajdują się w części Metody w dodatkowym dodatku.
Komplementarna synteza DNA i ilościowe oznaczenie PCR
Komplementarny DNA (cDNA) został zsyntetyzowany przy użyciu systemu SuperScript III do syntezy pierwszej nici i starterów oligo-dT (Invitrogen). Startery dla pięciu genów 17q21 (IKZF3, ZPBP2, GSDMB, ORMDL3 i GSDMA) oraz gen porządkowy (POLR2C) zaprojektowano za pomocą IDT SciTools (Integrated DNA Technologies) (Tabela S2 w Dodatku Aneks). Oznaczenie ilościowej reakcji łańcuchowej polimerazy (qPCR) przeprowadzono z użyciem Platinum SYBR Green qPCR SuperMix-UDG (Invitrogen) i systemu 7900HT Fast Real-Time PCR (Applied Biosystems).
Analiza danych ekspresji genów
Spośród pięciu genów w locus 17q21, IKZF3, GSDMB i ORMDL3 pomyślnie zamplifikowano w niestymulowanych i stymulowanych HRV PBMC uzyskanych od 100 uczestników. Każdą reakcję qPCR przeprowadzono dwukrotnie, a do analizy włączono tylko próbki o współczynniku zmienności mniejszym niż 0,02. Po wyłączeniach było 96 sparowanych próbek niestymulowanych i stymulowanych HRV PBMC do badań ekspresji IKZF3, 97 par próbek do badań ekspresji GSDMB i 97 sparowanych próbek do badań ekspresji ORMDL3. Dodatkowe szczegóły analizy danych qPCR znajdują się w sekcji Metody dodatku dodatkowego.
Zastosowaliśmy sparowany test t do oceny różnic w ekspresji każdego genu 17q21 (IKZF3, GSDMB i ORMDL3) pomiędzy niestymulowanymi i stymulowanymi HRV komórkami
[przypisy: tyreoidektomia, kękę nowe rzeczy chomikuj, yerbamarket ]

Tags: , ,

No Responses to “Rhinovirus Wheezing Choroba i ryzyko genetyczne astmy u dzieci AD 4”

  1. Breadmaker Says:

    Moze i prawda ale lekarze mowia inaczej

  2. Klaudia Says:

    [..] Cytowany fragment: psycholog w Rzeszowie[...]

  3. Karolina Says:

    Sama chodziłam z czymś takim

  4. Mia Says:

    Article marked with the noticed of: wizyty domowe warszawa[...]

  5. Celtic Charger Says:

    To sa sprawdzone informacje czy dopiero w fazie testow klinicznych

  6. Bowie Says:

    [..] Blog oznaczyl uzycie nastepujacego fragmentu podgrzewacz do kamieni[...]

  7. Joanna Says:

    Mnie bardzo pomogła suplementacja wysoką dawką omegi 3

Powiązane tematy z artykułem: kękę nowe rzeczy chomikuj tyreoidektomia yerbamarket